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尺寸排阻色譜柱是一種廣泛應(yīng)用于生物分析領(lǐng)域的工具，其工作原理主要基于分子大小差異進(jìn)行分離。利用柱內(nèi)固定相中孔隙與分子間的物理作用來實(shí)現(xiàn)分離。具體來說，聚合物分子在柱子中的孔道中被篩選，較大的分子無法通過尺寸較小的孔道，只有較小的分子才能通過這些孔道，從而實(shí)現(xiàn)不同分子尺寸的分離。其優(yōu)點(diǎn)在于其分離速度快、操作簡單、分離效果好。此外，該技術(shù)不依賴于分子之間的親和性或化學(xué)性質(zhì)，因此適用于各種生物大分子，如蛋白質(zhì)、多肽和核酸等的分離。
尺寸排阻色譜柱的安裝過程：
1、連接入口端：將色譜柱的入口端與液相色譜儀的泵出口管道牢固連接，一般采用不銹鋼管或聚醚醚酮（PEEK）管。連接時(shí)要確保管道插入色譜柱入口端足夠的深度，并使用合適的扳手?jǐn)Q緊接頭，防止泄漏，但注意避免過度用力擰緊而損壞色譜柱入口端的連接部件?？梢栽诮宇^處適當(dāng)涂抹密封脂增強(qiáng)密封效果。
2、安裝柱頭過濾器：在色譜柱入口處安裝柱頭過濾器，其作用是防止樣品中的顆粒雜質(zhì)進(jìn)入色譜柱造成堵塞。將柱頭過濾器放置在色譜柱入口端，通過螺紋連接或卡套連接等方式固定在色譜柱上，確保安裝方向正確且與色譜柱入口緊密貼合，防止出現(xiàn)死體積過大的情況。
3、連接出口端：把色譜柱的出口端與檢測器的流通池入口連接起來，同樣使用合適的管道并保證連接牢固且無泄漏。連接完成后，將柱尾螺母擰緊在色譜柱出口端以確保密封良好。注意不要讓任何雜質(zhì)進(jìn)入色譜柱內(nèi)部。
4、調(diào)整色譜柱位置：根據(jù)液相色譜儀的結(jié)構(gòu)和使用要求，將安裝好色譜柱的流路部分放置在合適的位置。如果有溫控要求的色譜柱，需將其安裝在溫度控制器相應(yīng)的位置，確保色譜柱能在設(shè)定溫度下工作。調(diào)整時(shí)要避免對色譜柱造成碰撞或施加過大外力，防止破壞其內(nèi)部填料結(jié)構(gòu)。
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